1          Einleitung

1.1      Eisenstoffwechsel

            1.2      Eisenstoffwechselstörungen

                        1.2.1   Eisenmangel

                        1.2.2   Eisenüberladung

                        1.2.3   Mechanismus der Eisenschädigung

            1.3      Tiermodelle

            1.4      Stoffaufnahme in die Zelle

                        1.4.1   Eigenschaften der Plasmamembran

                        1.4.2   Transmembranäre Transportprozesse

                                   1.4.2.1 Passiver Transport

                                   1.4.2.2 Aktiver Transport

                        1.4.3   Aufnahme natürlicher Eisenverbindungen

            1.5      Ziel der vorliegenden Arbeit

 

2          Material und Methoden

            2.1      Verwendete Lösungen

                        2.1.1   Perfusionslösungen für die Hepatozytengewinnung

                        2.1.2   Pufferlösungen für die Zellfraktionierung und die Zellinkubation

            2.2      Radioaktiv markierte Eisenverbindungen und ihre Synthese

                        2.2.1   Synthese von 3,5,5-Trimethylhexanoylclorid

                        2.2.2   Synthese von [59Fe]Ferrozen

                        2.2.3   Synthese von [55Fe](3,5,5-Trimethylhexanoyl)Ferrozen

                        2.2.4   Herstellung der radioaktiv markierten Eisenchelate

            2.3      Gewinnung viabler Hepatozyten

                        2.3.1   Leberperfusion

                        2.3.2   Zellfraktionierung

                        2.3.3   Viabilitätbestimmung

                        2.3.4   Zellzahlbestimmung

            2.4      Durchführung der Inkubation

            2.5      Bestimmung der Radioaktivität

            2.6      Software und Statistik

            2.7      Material

 

3          Ergebnisse

            3.1      Synthese der Ferrozene

                        3.1.1   Synthese von [59Fe]Ferrozen

                        3.1.2   Synthese von [55Fe](3,5,5-Trimethyhexanoyl)Ferrozen

            3.2      Verfügbarkeit der Ferrozene für die Hepatocyten im Inkubationsmedium

                        3.2.1   Löslichkeit von Ferrozen in Ethanol und Dimethylsulfoxid

                        3.2.2   Dimethylsulfoxid als Lösungsmittel

                        3.2.3   Zytotoxizität von Dimethylsulfoxid

            3.3      Wiederfindung der eingesetzten Radioaktivität

                        3.3.1 Radioaktivitätsverluste im Inkubationsgefäß

                        3.3.2   Radioaktivitätsverluste im Eppendorfgefäß

            3.4      Eisenaufnahme der Hepatozyten

                        3.4.1. Eisen aus niedermolekularen Eisenchelaten

                                   3.4.1.1 [55Fe]-Askorbat

                                   3.4.1.2 [55Fe]-DTPA

                                   3.4.1.3 [55Fe]-Citrat

                        3.4.2   Eisen aus [59Fe]Ferrozen und [55Fe]TMH-Ferrozen

                                   3.4.2.1 [59Fe]Ferrozen

                                   3.4.2.2 [55Fe]TMH-Ferrozen

 

4          Diskussion

4.1      Methodik

            4.2      Eisenaufnahme aus [55Fe]-Askorbat, -Citrat und -DTPA

            4.3      Eisenaufnahme aus [59Fe]Ferrozen und [55Fe]TMH-Ferrozen

 

 

5          Zusammenfassung

 

6          Anhang

6.1      Abbildungsverzeichnis

            6.2      Tabellenverzeichnis

            6.3      Literaturverzeichnis

            6.4      Danksagung

            6.5      Lebenslauf

            6.6      Erklärung