Charakterisierung putativer humaner Autoantigene

Abstract

Kürzlich sind als Ziel von Autoantikörpern die putativen Autoantigene LAMP2 (Renate Kain, 2008) in Zusammenhang mit ANCA-assoziierten Glomerulonephritiden, sowie NOL8, SHC2 und LSM14 (Cindy Hempp, 2007) als atypische ANA beschrieben worden. In der vorliegenden Arbeit wurde durch forcierte Antigenexpression auf der Zelloberfläche von Zellkulturen ein Screening-System für eine große Zahl an mit Autoimmunerkrankungen assoziierten Humanseren erstellt, um das Vorkommen der o.g. Autoantikörper in diesen zu untersuchen. Da Unterschiede zwischen den Ergebnissen des hier und des von Renate Kain verwendeten LAMP2-AK-Tests vorlagen, wurden sukzessive Modifikationen am Expressionssystem für LAMP2 vorgenommen. Weiterhin wurden zwei DNA-Immunisierungsprotokolle durch Gene-Gun-Applikation und Tätowierung von DNA-Lösung miteinander verglichen.

Recently the putative autoantigenes LAMP2 (Renate Kain, 2008), linked to ANCA-associated glomerulonephritides, as well as NOL8, SHC2 and LSM14 (Cindy Hempp, 2007), as atypic ANA have been described as targets of autoantibodies. In the present thesis a screening system for autoantibodies has been established by forced autoantigen expression on the surface of cell cultures in order to investigate the prevalence of the above-named autoantibodies in a large number of autoimmune disease-associated human sera. Since there have been differences between the results of our LAMP2-AB-Test and of Renate Kain's, we successively modified the expression system for LAMP2. Furthermore, two DNA-immunization-protocols for the application of DNA-solution by Gene-Gun and by tattooing were compared to each other.