Auswirkung einer Tn-Antigen-Expression auf das duktale Adenokarzinom des Pankreas

Abstract

In dieser Arbeit werden die Auswirkungen einer aberranten O-Glykosylierung infolge eines Cosmc-knockouts auf die Proliferation, Progression und Fähigkeit zur Metastasierung des duktalen Adenokarzinom des Pankreas (PDAC) in vivo gezeigt. Dafür wurden Western-Blot Analysen, histopathologische Auswertungen sowie immunhistochemische Färbungen der Pankreata der Mauslinien: KrasG12D/+, KrasG12D/+;Cosmc-/-, und Cosmc-/- mit wildtypischen Mauslinien verglichen. Im Fokus standen dabei die beiden tumorassoziierten Genotypen KrasG12D/+;Cosmc-/- und KrasG12D/+. KrasG12D/+;Cosmc-/- wies deutlich schwerere sowie hyperplasierte und narbig durchzogene Organe auf. Histopathologisch zeigten sich deutlich mehr Vorläuferläsionen sowie manifeste Karzinome als in der gleichen Altersgruppe der KrasG12D/+ Tiere. Auch mikroskopisch konnte in der HE-Färbung bereits im jungen Alter ein deutlicher, desmoplastischer Umbau mit Verdrängung der physiologischen Azini sowie eine Hyperplasie der Ductus verzeichnet werden. Passend dazu imponierte in der Ki-67 Färbung eine gesteigerte Proliferationsrate in KrasG12D/+;Cosmc-/-. Durch die Gegenüberstellung von Western-Blot Analysen und immunhistochemischen Färbungen erfolgte der Nachweis einer physiologischen sowie differentiellen O-Glykosylierung. Nach Fraktionierung des Gewebes in Zytosol, Zellkerne sowie Membranen, zeigte sich eine recht gleichmäßige Verteilung der Tn Expression in KrasG12D/+;Cosmc-/-. In einer Masson-Goldner-Trichom-Färbung konnte, gestützt durch Ergebnisse der α-SMA Färbung, eine starke Zunahme der Fibrosierung des Pankreasgewebes in KrasG12D/+;Cosmc-/-nachgewiesen werden. Die Analysen einzelner Signalkaskaden ergaben kein eindeutiges Ergebnis, wiesen jedoch deutliche Unterschiede zwischen den verschiedenen Genotypen auf und zeigten vermehrt pro-onkogene Tendenzen bei KrasG12D/+;Cosmc-/-. Eindrücklich war der Nachweis einer erhöhten EMT (Epithelialen-Mesenchymalen-Transition), als Zeichen einer gesteigerten Metastasierungstendenz in KrasG12D/+;Cosmc-/-.