Titel: Die Rolle von PIST in der subzellulären Verteilung von dem cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)
Sprache: Deutsch
Autor*in: Moormann, Theresa
Schlagwörter: subzelluläre Verteilung; PIST; apikale Sortierung; Positivregulator; Negativregulator
GND-Schlagwörter: IonenkanalGND
CFTRGND
MukoviszidoseGND
PlasmamembranGND
Protein-SortierungGND
Erscheinungsdatum: 2022
Tag der mündlichen Prüfung: 2023-02-03
Zusammenfassung: 
Der CFTR ist ein entscheidender Faktor im transepithelialen Ionen- und Wassertransport. Mutationen im Gen des CFTR führen unter anderem zu einer reduzierten Aktivität und zum vermehrten Abbau dieses Ionenkanals, wodurch die zystische Fibrose hervorgerufen wird, die ihrerseits durch einen hochviskosen Schleim charakterisiert ist. Aufgrund dessen besteht ein erhebliches Interesse an Strategien zur Verbesserung der funktionellen Rettung und dem daraus resultierenden erhöhten Plasmamembran-Targeting des mutierten Proteins. Eine der am häufigsten vorkommenden Protein-Protein Interaktionsdomäne ist die PDZDomäne. PIST, das eine solche Domäne aufweist, interagiert hierüber mit CFTR. In diesem Zusammenhang wird PIST als Negativregulator beschrieben, der die Expression von CFTR an der Plasmamembran verringert und den lysosomalen Abbau von CFTR begünstigt. NHERF1, das ebenso PDZ-Domänen aufweist, fungiert als funktionaler Gegenspieler von PIST. In dieser Arbeit wurde der Einfluss von PIST auf die CFTR-Proteinmenge und -Lokalisation in zwei in vitro Modellen sowie in einer PIST-knockout-Mauslinie analysiert. Überexpressionsexperimente zeigten, dass PIST und NHERF1 jeweils mit CFTR interagieren und um die Bindung an CFTR konkurrieren. In PIST-defizienten Calu-3 Zellen war die CFTR-Proteinmenge in der Western Blot Analyse unverändert. Auch in der konfokalen Mikroskopie stellte sich CFTR ähnlich zur Kontrolle apikal sortiert dar. Der Verlust von PIST spielte in dieser Zelllinie keine sichtbare Rolle. In der Analyse von Lunge und Leber der PIST-knockout-Mäuse mittels Western Blot konnte kein Anstieg des Gesamt-CFTR-Proteinlevels ermittelt werden. Das deutet wiederum an, dass PIST in Lungenepithelzellen nicht zum Abbau von endogenem wtCFTR beiträgt. Vielmehr zeichnet sich die Tendenz eines reduzierten CFTRProteinlevels in PIST-knockout-Mäusen ab. In Bezug auf endogen exprimierten wtCFTR in Mausgeweben kann PIST also nicht als negativer Regulator von CFTR angesehen werden. Experimente einer kooperierenden Arbeitsgruppe zeigten sogar, dass PIST eher als positiver Regulator gesehen werden muss, der zur korrekten apikalen Sortierung des Ionenkanals beiträgt. Es wird deutlich, dass die Funktion von PIST in Bezug auf CFTR stark vom zellulären Kontext abhängig ist.
URL: https://ediss.sub.uni-hamburg.de/handle/ediss/10119
URN: urn:nbn:de:gbv:18-ediss-107405
Dokumenttyp: Dissertation
Betreuer*in: Kreienkamp, Hans-Jürgen
Enthalten in den Sammlungen:Elektronische Dissertationen und Habilitationen

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