Expression von Kv1.3-Kaliumkanälen in retinalen Pigmentepithelzellen

Abstract

In vorliegender Arbeit wurde mit Hilfe einer immunhistochemischen Nachweismethode die Expression von Kv1.3-Kaliumkanälen in retinalen Pigmentepithelzellen in vivo und in vitro untersucht. Hierbei wurden unterschiedliche Kulturbedingungen verglichen. Es wurden bei gleich bleibendem Kulturmedium die Kultursubstrate Gelatine, Fibronektin und Kunststoff gegenübergestellt. Darüber hinaus wurden RPE-Zellen untersucht, die auf semipermeablen Membranen gezüchtet und in der Primärkultur mit serumfreiem Medium ernährt wurden. In der vorliegenden Arbeit wird gezeigt, dass RPE-Zellen in vivo mindestens an der basalen und baso-lateralen Membran Kv1.3-Kanäle ausbilden. Die Expression dieser Kanäle erfolgt ebenfalls bei den in dieser Untersuchung kultivierten RPE-Zellen und dies bis zur vierten Subkultur, unabhängig vom verwendeten Substrat. Die Auswertung der immunhistochemischen Färbung ergibt keine sichere Lokalisierung der exprimierten Kanäle innerhalb der kultivierten RPEZellen. Es ist jedoch wahrscheinlich, dass bei fortschreitender Kultivierung Kv1.3- Kanäle in der apicalen und basalen Membran ausgebildet werden und keine Polarisierung mehr stattfindet. Serumfrei und auf semipermeablen Membranen kultivierte RPE-Zellen hingegen bilden ausschließlich an der basalen beziehungsweise an der baso-lateralen Membran Kalium-Kanäle vom Kv1.3-Typ aus.