Der Nachweis des P2X7-Rezeptors im murinen Podozyten und seine Rolle in der anti-Podozyten Nephritis

Abstract

P2X7 ist ein liganden-gesteuerter nicht selektiver Ionenkanal, welcher durch extrazelluläres ATP aktiviert wird und von Zellen des angeborenen und erworbenen Immunsystems stark expliziert wird. Ziel dieser Arbeit war es, P2X7 in der gesunden und kranken Niere zu lokalisieren und insbesondere Podozyten als betroffene Zellen der Antikörper-mediierten Nephritis auf eine mögliche P2X7 Expression hin zu untersuchen. Zusätzlich sollte die Modulation von P2X7 als ein mögliches therapeutisches Ziel bei der Anti-Podozyten Nephritis untersucht werden. In dieser Arbeit konnte P2X7 in der Niere und besonders im Glomerulum nachgewiesen werden und gezeigt werden, dass die Expression im Rahmen der Anti-Podozyten Nephritis zunimmt. In kultivierten Podozyten gelang es, P2X7 als Protein nachzuweisen und es konnte gezeigt werden, dass Podozyten P2X7-abhängig auf ATP reagierten. Mäuse, welche mit einem P2X7 antagonistisch wirkenden Nanobody behandelt wurden, zeigten einen milderen Krankheitsverlauf in der Anti- Podozyten Nephritis (Danquah et al. 2016). Zusammenfassend deuten die Ergebnisse dieser Arbeit darauf hin, dass P2X7 bei der Entwicklung des podozytären Schadens eine Rolle spielen könnte. Die bekannte P2X7 Expression in Mesangialzellen und die hier dargestellte Steigerung der P2X7 Expression im kranken Glomerulum, sowie der Nachweis einer P2X7-abhängigen Reaktion in kultivierten Podozyten, deuten auf einen möglichen therapeutischen Nutzen einer P2X7 Inhibition bei Antikörper-mediierter Glomerulonephritis hin.

P2X7 is a ligand-gated ion channel belonging to the purinergic type 2 receptor family, which is highly expressed on inflammatory cells of the innate and adaptive immune system and is activated by extracellular ATP. Aim of this thesis was to localize P2X7 in the healthy and damaged kidney and in particular to investigate whether podocytes, a resident glomerular epithelial cell targeted by antibodies in the context of anti-podocyte nephritis, expressed and regulated P2X7 upon injury. In addition, the aim of this thesis was to investigate P2X7 as a possible therapeutic target in antipodocyte nephritis. In summary, we were able to detect a P2X7 expression in the glomerulum and to show that the expression of P2X7 was increased in anti-podocyte nephritis. We were able to detect a P2X7 expression at the protein level in cultivated podocytes and to demonstrate a P2X7-dependent reaction to ATP. Mice which were treated with an antagonistic antibody against P2X7 showed an alleviated course of anti-podocyte nephritis (Danquah et al. 2016). These results suggest that P2X7 could play a role in the development podocyte injury. The known expression of P2X7 in mesangial cells and the shown increased expression of P2X7 in the damaged glomerulum as well as the confirmation of an ATP dependent reaction in cultivated podocytes indicate a possible therapeutic use of P2X7 inhibition in antibody-mediated glomerulonephritis.