Einfluss einer Kokultivierung mit Hepatozyten auf die leberspezifische Genexpression von Mesenchymalen Stammzellen

Abstract

In dieser Dissertation wurde der Einfluss einer Kokultivierung von Hepatozyten und Mesenchymalen Stammzellen auf die Genespression untersucht. Hierfür ist zunächst von adulten Ratten aus Femur und Tibia das Knochenmark entnommen wurden. In weiteren Schritten sind hieraus die plastikadhärenten MSCs mithilfe eines retroviralen Vektors mit dem Gen für GFP beimpft wurden. Aus einer adulten Ratte sind dann die Hepatozyten isoliert wurden. In einer Kokultur sind die MSCs sowie die Hepatozyten zusammen bis zu 3 Wochen gehalten wurden und zu verschiedenen Zeitpunkten weiter untersucht wurden. Hierfür mussten die Zellen aus der Kokultur voneinander getrennt werden mittels FACS. Als nächster Schritt erfolgte eine Extraktion der RNA aus den Zellen. Aus dieser erhielt man die komplementäre DNA mittels RT PCR. Die erhaltene cDNA wurde dann auf die Expression leberspezifischer Proteine mittels PCR untersucht und anschließend eine Gelelektrophorese angefertigt.