Analysis on the Adhesive Properties of Ascites-derived Cells in Ovarian Cancer

Abstract

Ascites-derived cells from ovarian cancer patients contain spheroids (cell aggregates) and single cells. ADs (adherent cells) and NADs (non-adherent cells) were formed separately when ascites-derived cells were cultured in low-attachment flasks with MCDB or ascites fluid. NADs, mostly consisting of spheroids, presented high epithelial characteristics compared to mesenchymal ADs. EpCAM/CD24 are intensively expressed in NADs, while ADs mainly expressed CD90. Cell strainers, which were used for enriching spheroids and getting rid of most single cells, were confirmed as a good tool for the following characterization on the ascites-derived spheroids. Preliminary analysis on the expression of certain adhesion molecules (E-Cadherin and ALCAM) in spheroids in comparison to matched tumor tissue from the same patients were performed. These comparative analysis will give us more information about specific tumoral characteristics essential for OvCa metastasis.

Aszites-abgeleitete Zellen von Eierstockkrebspatientinnen enthalten sowohl Sphäroide (Zellaggregate) als auch Einzelzellen. ADs (adhärente Zellen) und NADs (nicht adhärente Zellen) wurden gebildet und separiert, indem die vom Aszites abgeleiteten Zellen in Flaschen mit geringer Anhaftung entweder mit MCDB-Medium oder in Aszitesflüssigkeit kultiviert wurden. NADs, die hauptsächlich aus Sphäroiden bestehen, zeigten im Vergleich zu mesenchymalen ADs hohe epitheliale Eigenschaften. NADs weisen hohe Expressionslevel für EpCAM / CD24 auf, während ADs hauptsächlich CD90 exprimieren. Zellsiebe, die zur Anreicherung von Sphäroiden und zur Entfernung der meisten Einzelzellen verwendet wurden, erwiesen sich als gutes Werkzeug für die weitere Charakterisierung der vom Aszites abgeleiteten Sphäroide. Es wurden vorläufige Analysen zur Expression bestimmter Adhäsionsmoleküle (E-Cadherin und ALCAM) in Sphäroiden im Vergleich zu dem jeweiligen Tumorgewebe einer Patientin durchgeführt. Diese vergleichenden Analysen sollen weitere Informationen zu spezifischen Tumoreigenschaften aufzeigen, welche für die Eierstockkrebs-Metastasierung entscheidend sind.